肌酐含量(肌氨酸氧化酶法)檢測試劑盒48樣
測定意義
肌酐(Creatinine,CRE)是肌肉代謝的產(chǎn)物,主要通過腎小球濾過排出體外。在正常情況下,體內(nèi)肌酐的含量基本穩(wěn)定。血液中的肌酐濃度可作為檢測腎小球濾過功能的指標(biāo)之一。
測定原理
肌酐酶特異作用于肌酐生成肌酸,肌酸在肌酸酶和肌氨酸氧化酶的相繼作用下生成過氧化氫,過氧化氫與顯色劑反應(yīng)呈現(xiàn)紫色,該有色物質(zhì)在546nm有最大吸收峰,進而計算得到肌酐含量。
需自備的儀器和用品
可見分光光度計/酶標(biāo)儀、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、蒸餾水。
測定操作
測定操作
1、分光光度計或酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,設(shè)置溫度再37℃,調(diào)節(jié)波長至546nm。
2、在EP管中加入下列試劑:
預(yù)實驗的意義
注意
1.如果ΔA大于0.8,需要將樣本用蒸餾水稀釋,計算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。
如果ΔA的值小于0.01,可增加樣本加樣體積V1(如由6μL增至20μL,則試劑二相應(yīng)減少,空白管和標(biāo)準(zhǔn)管變化同測定管),或增加樣本取樣質(zhì)量W;則改變后的V1和W需帶入公式重新計算。
預(yù)實驗的意義
比色法檢測試劑盒預(yù)實驗非常重要
1、確定該試劑盒是否適合客戶的樣本檢測,以免造成試劑盒和樣本的浪費(比如低表達(dá)處理的樣本);
2、熟悉生化試劑盒的操作流程,尤其是初次使用生化試劑盒測定;
3、確定樣本的處理方法及稀釋倍數(shù)是否合適;
4、了解實驗過程中可能出現(xiàn)的實驗現(xiàn)象或問題,以便于及時作出調(diào)整;
5、通過3 - 5組預(yù)實驗,判斷試劑盒對于樣本的最佳適應(yīng)稀釋濃度范圍,指導(dǎo)實驗樣本稀釋比例。
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