土壤α-半乳糖苷酶活性檢測(cè)試劑盒

測(cè)定意義

S-α-GAL能夠催化水解芳基或烴基與糖基原子團(tuán)之間的糖苷鍵生成葡萄糖，是纖維素分解酶系中重要組成成分之一，在土壤微生物的糖類代謝方面具有重要生理功能。

測(cè)定原理

S-α-GAL分解4-MUF -α-D-吡蝻半乳糖苷，產(chǎn)生熒光物質(zhì)，通過(guò)測(cè)定熒光值升高速率來(lái)計(jì)算S-AGC活性。

自備用品

酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、恒溫培養(yǎng)箱、可調(diào)式移液器、黑色96孔板和蒸餾水。

測(cè)定步驟

1、熒光酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上，設(shè)置激發(fā)光波長(zhǎng) 355 nm，測(cè)定波長(zhǎng) 450nm。

2、加樣表

試劑名稱	測(cè)定管	空白管
震蕩條件下取勻待測(cè)液（μLL）	200	-
蒸餾水（μL）	-	200
試劑二（μL）	200	200
混勻， 30℃避光振蕩反應(yīng)3h后， 3000g 4℃離心3min，取上清液200μL于黑色96孔板中，檢測(cè)熒光值，激發(fā)波長(zhǎng)355nm，發(fā)射波長(zhǎng)450nm。熒光值分別為A測(cè)定A空白，計(jì)算ΔA=A測(cè)定管-A空白管。

預(yù)實(shí)驗(yàn)的意義

比色法檢測(cè)試劑盒預(yù)實(shí)驗(yàn)非常重要

1、確定該試劑盒是否適合客戶的樣本檢測(cè)，以免造成試劑盒和樣本的浪費(fèi)（比如低表達(dá)處理的樣本）；

2、熟悉生化試劑盒的操作流程，尤其是初次使用生化試劑盒測(cè)定；

3、確定樣本的處理方法及稀釋倍數(shù)是否合適；

4、了解實(shí)驗(yàn)過(guò)程中可能出現(xiàn)的實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象或問(wèn)題，以便于及時(shí)作出調(diào)整；

5、通過(guò)3 - 5組預(yù)實(shí)驗(yàn)，判斷試劑盒對(duì)于樣本的最佳適應(yīng)稀釋濃度范圍，指導(dǎo)實(shí)驗(yàn)樣本稀釋比例。

注意

正式測(cè)定前務(wù)必取 3 - 5 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定。

ELISA試劑盒

PCR試劑盒