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KRAS基因的全名叫Kirsten Rat Sarcoma Viral Oncogene Homolog，（Kirsten大鼠肉瘤病毒癌基因同源物），它編碼一種小GTP酶，該酶屬于RAS超蛋白家族。KRAS基因位于1號(hào)染色體上。大約有30%的癌癥患者都存在KRAS突變，其中包括90%的胰腺癌，50%的結(jié)腸癌和25%的肺癌。在非小細(xì)胞肺癌中，KRAS基因突變占20～30%，多存在于肺腺癌中，肺鱗癌中比較罕見(jiàn)。在KRAS突變類(lèi)型中，c.34G>T(p.G12C)突變最常見(jiàn)，約占所有KRAS突變的44％，最常見(jiàn)的癌種是非小細(xì)胞肺癌，因此快速檢測(cè)此突變具有重要的意義。為此本公司開(kāi)發(fā)了簡(jiǎn)單快捷的檢測(cè)該位點(diǎn)的點(diǎn)突變探針?lè)╭PCR檢測(cè)試劑盒，它具有下列特點(diǎn)：
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成分 |
規(guī)格 |
包裝 |
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2×點(diǎn)突變Probe qPCR MasterMix |
0.5mL |
0.5mL本色管 |
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超純水 |
1mL |
1.5mL藍(lán)蓋管 |
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rs121913530位點(diǎn)檢測(cè)引物-探針混合液干粉 |
50次 |
0.5 mL白色管 |
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rs121913530位點(diǎn)GG陽(yáng)性對(duì)照(1×10E4拷貝/μL) |
250 μL |
1.5mL棕色管 |
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rs121913530位點(diǎn)TT陽(yáng)性對(duì)照(1×10E4拷貝/μL) |
250 μL |
0.5mL黃蓋管 |
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使用手冊(cè) |
1份 |
無(wú) |
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本產(chǎn)品采用五孔盒包裝 |
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使用方法
1. 一般的熒光定量PCR儀在基因分型的模式下，都可以自動(dòng)根據(jù)兩個(gè)通道獲得的熒光值，計(jì)算每個(gè)樣品的比值（HEX值/FAM值），并描出散點(diǎn)圖。突變基因型的比值點(diǎn)將位于散點(diǎn)圖的X軸方向，正?；蛐偷谋戎祵⑽挥赮軸方向，雜合子基因型的比值將位于中間，陰性對(duì)照的比值將位于原點(diǎn)附近。如果陰性對(duì)照有任何信號(hào)，則表示污染，本次實(shí)驗(yàn)無(wú)效，需要尋找原因。
2. 也可以手動(dòng)整理下表進(jìn)行基因型判斷。首先設(shè)置閾值，F(xiàn)AM的閾值根據(jù)GG陽(yáng)性對(duì)照的FAM熒光值設(shè)置，HEX的閾值根據(jù)TT陽(yáng)性對(duì)照的HEX熒光值設(shè)置。如果陰性對(duì)照有任何信號(hào)，則表示污染，本次實(shí)驗(yàn)無(wú)效，需要尋找原因。如果實(shí)驗(yàn)有效，則分析樣品。如果樣品Ct值低于35，則算有擴(kuò)增。高于35，則算無(wú)擴(kuò)增。
樣品DNA
低溫運(yùn)輸，-20℃保存，有效期1年
