乳酸脫氫酶細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒比色法
測(cè)定意義
本試劑盒可用于以乳酸脫氫酶(LDH)釋放為指標(biāo)的細(xì)胞毒性檢測(cè)。
測(cè)定原理
乳酸脫氫酶催化乳酸氧化生成丙酮酸,同時(shí)使NAD?還原生成NADH和H?,NADH在1-mPMS的作用下使WST-8顯橙黃色,通過(guò)測(cè)定450nm下吸光值增加速率,進(jìn)而計(jì)算乳酸脫氫酶活性。
自備儀器和用品
酶標(biāo)儀、96孔板、可調(diào)式移液器、離心機(jī)、恒溫箱、震蕩儀、冰、蒸餾水。
試劑清單
注意
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試劑名稱(chēng) |
規(guī)格 |
數(shù)目 |
貯藏 |
備注 |
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試劑一 |
液體2.5mL |
x1 |
-20°C |
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試劑二 |
粉劑 |
x1 |
-20°C,避光 |
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試劑三 |
液體5mL |
x1 |
4°C,避光 |
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試劑四 |
液體1.2mL |
x1 |
-20°C,避光 |
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試劑五 |
液體10mL |
x1 |
4°C |
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注意
1、正式測(cè)定前務(wù)必取 3 - 5 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定。
2、為了您的安全和健康,請(qǐng)佩戴好防護(hù)用具。
預(yù)實(shí)驗(yàn)的意義
預(yù)實(shí)驗(yàn)的意義
比色法檢測(cè)試劑盒預(yù)實(shí)驗(yàn)非常重要
1、確定該試劑盒是否適合客戶(hù)的樣本檢測(cè),以免造成試劑盒和樣本的浪費(fèi)(比如低表達(dá)處理的樣本);
2、熟悉生化試劑盒的操作流程,尤其是初次使用生化試劑盒測(cè)定;
3、確定樣本的處理方法及稀釋倍數(shù)是否合適;
4、了解實(shí)驗(yàn)過(guò)程中可能出現(xiàn)的實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象或問(wèn)題,以便于及時(shí)作出調(diào)整;
通過(guò)3 - 5組預(yù)實(shí)驗(yàn),判斷試劑盒對(duì)于樣本的最佳適應(yīng)稀釋濃度范圍,指導(dǎo)實(shí)驗(yàn)樣本稀釋比例。
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